《欧洲生化学会联合会快报》针对癌细胞的自然杀伤细胞活性的乳酸菌

肿瘤坏疽因子凋亡有相关诱导性配合基(TRAIL)是能够诱导恶性肿瘤细胞凋亡的内在性细胞活素。在这里,我们首先展示乳酸菌对人末梢血细胞(PBMC)的TRAIL产生的诱导效果。 经过乳酸菌的处理,诱导了PBMC的细胞表面及培养液。一部分依赖INF-α和IFN-γ的乳酸菌成功诱导了TRAIL的产生。而且,TRAIL中和抗体有效阻碍了NK的活性。

摘要

肿瘤坏疽因子凋亡有相关诱导性配合基(TRAIL)是能够诱导恶性肿瘤细胞凋亡的内在性细胞活素。在这里,我们首先展示乳酸菌对人末梢血细胞(PBMC)的TRAIL产生的诱导效果。 经过乳酸菌的处理,诱导了PBMC的细胞表面及培养液。一部分依赖INF-α和IFN-γ的乳酸菌成功诱导了TRAIL的产生。而且,TRAIL中和抗体有效阻碍了NK的活性。其结果就是乳酸菌通过产生TRAIL,促进了NK活性。并且这一新产生的TRAIL,可能成为日后与恶性肿瘤对抗的新突破口。

1. 序言
腫瘤壞疽因子凋亡有相關誘導性配合基(TRAIL)能夠有選擇性地通過in vivo及in vitro誘導癌細胞凋亡[1,2]。因此,對TRAIL受體的替換TRAIL蛋白質及激動劑抗體,進行了針對惡性腫瘤的臨床實驗治療[3,4]。TRAIL通過細胞凋亡受體(DR)5或者DR4的相互作用,誘導其凋亡。TRAIL-DR4/5的途徑,可認爲其發揮了抗癌效果的本質[5]。TRAIL作爲膜蛋白及可溶性蛋白質在免疫細胞中被發現了其內在性[6]。內在性TRAIL擔任著阻礙癌細胞産生的重要任務。其理由爲TRAIL的確實會讓小鼠的惡性程度加快[7]。因此,不僅是替換TRAIL或TRAIL激動劑抗體,它也成爲了內在性TRAIL的生成材料,制約著抗癌問題。各種乳酸菌在發酵産品行業中擔任著重要的任務。有幾種發酵産品已經被報告具有免疫效果[8]。而且乳酸菌也有具有in vitro和in vivo的抗癌效果報告[9,10]。大規模非有意臨床實驗中發現,Lactobacillus(L.)casei制品可能具有抑制癌細胞的效果[11,12]。但是,乳酸菌的抗癌效果,在分子結構方面我們幾乎還是一無所知。

本研究中,我們將使用腌漬工業中運用的益生菌種Lactobacillus plantarum。有報告稱,每天攝取L.plantarum將使健康成人的獲得性免疫功能增強[13],對小鼠的實驗中,也顯示其每日攝取具有抗癌效果[14]。在報告中,我們對L.plantarum誘導TRAIL産生進行實驗,結果顯示其能夠提高針對癌細胞的NK活性。

2. 材料和方法

2.1 乳酸菌株
L.plantarumS1,DB22和DS41是從日本腌菜中分離出來,通過MRS培養皿(Oxoid, Basingstoke, UK)進行24小時30℃的普通培養,培養液使用1mg/ml稀釋食鹽水,95℃,五分熟。

2.2 細胞培養
人前列腺癌PC3細胞按以前記載的方法進行維持[15]。正常的人末梢血球細胞(PBMC)按以前記載的方法進行分離[15]。PBMC是經過知情的健康志願者同意後采取的。

2.3 細胞表面TRAIL或TRAIL受體的流式細胞儀分析
使用的單一克隆抗體(mAb)如下。Phycoerythrin(PE)的共轭小鼠抗人TRAILmAb和fluorescein-isothiocyanate(FITC)的共轭小鼠抗人CD4mAb(BD PharMingen, San Diego, CA)和FITC-共轭小鼠抗人CD56mAb和小鼠IgG1;PE共轭小鼠抗人DR4,DR5,受體1(DcR1)或者DcR2 mAb及小鼠IgG1(eBioscience, San Diego, CA) 兩PBMA和PC3細胞爲